細(xì)胞培養(yǎng)(cell culture)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境(無(wú)菌、適宜溫度、酸堿度和一定營(yíng)養(yǎng)條件等),使之生存、生長(zhǎng)、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù),還是其中之一的生物克隆技術(shù)來(lái)說(shuō),細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)*的過(guò)程,細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)??寺?。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可以由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過(guò)大量培養(yǎng)成為簡(jiǎn)單的單細(xì)胞或極少分化的多細(xì)胞,這是克隆技術(shù)*的環(huán)節(jié),而且細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù),通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)既可以獲得大量細(xì)胞,又可以借此研究細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞的合成代謝、細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖等。
下面小編總結(jié)的細(xì)胞培養(yǎng)的幾條小常識(shí)一起來(lái)圍觀:
1、貯存在冰箱中的瓶口已開的培養(yǎng)基,可能在放置幾天后顏色變紫。這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時(shí),碳酸氫鈉導(dǎo)致了pH值的上升。您可以在使用前松開瓶口,在CO2培養(yǎng)箱孵育培養(yǎng)基10-15min,來(lái)校正溶液的pH值(確定松開瓶口以保證氣體交換)。
2、一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。
3、血清的熱滅活在免疫分析時(shí)可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活血清。熱滅活是以往*的操作步驟,并沒(méi)有確鑿的證據(jù)說(shuō)明這樣做是有益的。相反,對(duì)大部分細(xì)胞而言,一般都不推薦熱滅活血清。因?yàn)榧訜峥赡苁寡逯械某恋碓黾?,使您誤以為污染。
4、在訂購(gòu)的細(xì)胞到達(dá)后,應(yīng)立即復(fù)蘇,如果培養(yǎng)基還沒(méi)有準(zhǔn)備好,可將其放入液氮中,盡快復(fù)蘇。千萬(wàn)不能放置在-20或-80℃的冰箱內(nèi)。
5、如何避免血清中沉淀物的產(chǎn)生?
6、請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在電熱恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
7、 若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30min的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
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