喆圖小編今天來說說霉菌的培養(yǎng)和觀察的詳情摘要:通過在一定固定環(huán)境下培育,根霉,毛霉,黑曲霉,青霉四種霉菌,先通過菌種的外形對其有一個“宏觀”的認(rèn)識,然后再在顯微鏡低倍或高倍鏡下分別觀察四種菌的形態(tài),孢子囊及孢子形態(tài),菌絲形態(tài)等方面。發(fā)現(xiàn)根霉,黑曲霉和青霉菌絲均有橫隔;青霉的分生孢子小梗呈掃帚狀等現(xiàn)象。
接下來就說說實(shí)驗材料及步驟
(一) 實(shí)驗材料
根霉,毛霉,黑曲霉,青霉,土豆瓊脂培養(yǎng)基,培養(yǎng)皿,載玻片,蓋玻片,鑷子,顯微鏡,小刀,U形管等。
(二) 實(shí)驗步驟
1、配置培養(yǎng)基:根據(jù)原料用量配置土豆培養(yǎng)基。配置時,先急火煮沸,在溫火加熱20min,若有渾濁出現(xiàn),則需過濾,然后定容。包扎土豆培養(yǎng)基,甘油等其他用品。滅菌后取出備用2、培養(yǎng)小室準(zhǔn)備及滅菌 在培養(yǎng)皿底部鋪一張略小于皿底的圓形濾紙片,濾紙片上依次放上“U”形載玻片擱架、載玻片、蓋玻片-四片,蓋上皿蓋,牛皮紙包扎,于恒溫干燥箱中121℃滅菌30min烘干備用;
2、瓊脂薄片制作:
a) 將稍微冷卻的培養(yǎng)基,倒在培養(yǎng)皿 中,做成薄平板。培養(yǎng)基應(yīng)該要倒 得薄而均勻。注意無菌操作。
b) 用解剖刀將瓊脂薄平板切成邊長不大于1cm的瓊脂薄片
c) 用解剖刀將瓊脂薄片移至小室載玻片上(一個載玻片上方兩塊薄片)
3、取菌接種:用接種環(huán)挑取少量待觀察的霉菌孢子(霉菌菌種的表面輕輕刮取即可),接種于固體培養(yǎng)基邊緣,以便于霉菌生長。接種時只要將帶菌的接種環(huán)在載玻片上輕輕碰幾下即可。接種量要少,以免培養(yǎng)后菌絲過于稠密而影響觀察。
4、加蓋玻片:用無菌鑷子將皿內(nèi)的蓋玻片蓋在瓊脂薄層上,用鑷子輕壓蓋玻片,使蓋玻片和載玻片之間的距離相當(dāng)接近,但不能壓扁。蓋玻片不能緊貼載玻片,要彼此留有小縫隙,一是為了通氣,二是使各部分結(jié)構(gòu)平行排列,易于觀察。
5、倒保濕劑:每皿倒入約2-3mL 20%的經(jīng)滅菌處理的甘油,使皿內(nèi)濾紙*濕潤,以保持皿內(nèi)濕度,蓋上皿蓋。制成載玻片濕室。
6、正置培養(yǎng):將平皿置于27℃霉菌培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一周。
7、觀察: 將培養(yǎng)好的載玻片取出,置于顯微鏡下直接觀察。
(三)實(shí)驗結(jié)果及分析
實(shí)驗結(jié)果
1.根霉:菌絲無隔,有假根、匍匐菌絲。假根著生處有向上直立的孢囊梗,其頂端膨大成孢子囊,底部為半球形囊軸。
2.毛霉:孢囊梗直接由菌絲出,頂端為球形孢子囊
3.黑曲霉:菌絲有隔,氣生菌絲分化為分生孢子梗(無隔),頂端 膨脹為球狀頂囊。
4.青霉:菌絲有隔,分生孢子梗頂端不膨大,無頂囊,多次分枝成幾輪小梗,小梗頂端長孢子。分生孢子梗呈掃帚狀。
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